具有发改委立项用途的工程咨询资格证书,甲级资质,专业:农业_轻工_机械_建材_建筑_电子_纺织_化工_医药
老木一支笔 中国可行性研究分析/申请报告著名品牌
首 页 | 机构介绍 | 专家团队 | 政策研究 | 工程咨询 | 可行性研究报告 | 项目申请报告 | 项目评估报告 | 商业计划书 | 行业研究 | 业 绩
农业| 林业| 轻工| 食品| 机械 | 能源 | 化工 | 医药 | 电子 | 纺织 | 汽车 | 钢铁 | 冶金 | 建筑 | 建材 | 市政 |环境 |旅游 |物流 |服务
16年来,为何全国30多个省市区上千家企业,委托我们编制可行性研究报告、资金/项目申请报告?
因为我们:有实力,品牌硬,讲信誉!因为我们:创建的历史长,全国的分部多,做过的案例多!
因为我们:资质高,专业多,业务广!因为我们:权威性高!通过率高!成功率高!更超值划算!
老木一支笔,中国甲级资质工程咨询单位!具有国家发改委颁布的甲级工程咨询资质证书.
专业:农业,轻工,食品,机械,建筑,建材,医药,化工,冶金,旅游,电子,纺织,能源,市政,人防,节能,综合等.
已累计完成全国30多个省市区上千家企业项目,协助企业成功获得征地立项,政策扶持,财政资金,融资合作.
我们已经完成的可行性报告|可行性研究报告|项目申请报告|资金申请报告|项目建议书涉及行业如下:
房地产开发:住宅-写字楼-商业地产-工业地产-产业园区 旅游开发:度假村-生态旅游-酒店-娱乐休闲-观光
工业制造:轻工-冶金-钢铁-机械-设备-电子-服装-纺织-建材-汽车 食品饮料:食品-酒类-保健品-果蔬饮料
农业产业化:种植-种子-饲料-蔬菜-食用菌-农机-粮油-经济林-花卉-苗木-果品-畜牧加工-饲养-水产-养殖
化工医药:橡胶-塑料-轮胎-石化-润滑油-化肥农药-生物工程-医药-中草药-新药制药-保健-医疗器械-医院
能源开发:煤炭-电力-水电-火电-风电-太阳能-沼气-生物柴油-电池 基础设施:市政-园林-交通-水务-环保
科技&专利:IT技术-网络产品-高科技术-专利实施 贸易&服务:商业-外贸-教育-学校-金融-文化-体育-传媒
您现在的位置:首页 >> 技术标准
技术标准 --

槐花多糖提取工艺生物活性评价技术
发布:老木一支笔 浏览量:1013  来源:http://www.laomu8.com 进入: bbs
关键词:槐花多糖提取
立足山东,联动安徽、山西、青海、新疆,服务全国!
已累计为全国30多个省市区,上千家企业及投资创业者,
协助成功获得了立项、征地、上市、资金、投资、融资!
1 范围
本规程规定了槐花多糖提取工艺及其生物活性评价技术的术语和定义、试剂或材料、仪器设备、槐花多糖的提取、苯酚-硫酸法测定多糖含量和生物活性评价等标准。
本规程适用于槐花多糖用作动物用免疫佐剂和免疫增强剂的制备和检验。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 603 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 14925 实验动物 环境及设施
GB/T 14926.54 实验动物 血凝抑制试验
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 
分泌型免疫球蛋白A Secretory Immunoglobulin A,SIgA
sIgA主要分布在唾液、泪液、肠胃液、乳汁以及呼吸道分泌液。在外分泌液当中,是机体黏膜免疫当中的主要抗体。在肠道黏膜免疫当中起到关键作用的是分泌型免疫球蛋白A(Secretory Immunoglobulin A,SIgA)。作为肠粘膜上的主要免疫球蛋白,它是肠道黏膜上的第一道防线,对各种内源共生菌及外源入侵的病原体都有抵抗作用。
3.2 
血凝与血凝抑制试验 hemagglutination and hemagglutination inhibition test
血凝试验(hemagglutination test,HA)是指某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种或某几种动物的红细胞发生凝集,这种凝集红细胞的现象称为血凝,也称直接血凝反应,利用这种特性设计的试验称血凝试验。
血凝抑制试验(hemagglutination inhibition test,HI)是指当病毒的悬液中先加入特异性抗体,且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素,则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或其血凝素直接接触,这时红细胞的凝集现象就被抑制,称为血凝抑制,利用这种特性设计的试验称血凝抑制试验。
3.3 
酶联免疫吸附实验 enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA
将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。
4 试剂或材料
4.1 牛血清白蛋白(BSA),配制方法见附录A。
4.2 1%鸡红细胞:配制方法见附录A。
4.3 纤维素酶。
4.4 Sevag试剂:氯仿:正丁醇=5:1(V/V)混合。
4.5 无水乙醇。
4.6 商品化新城疫灭活疫苗。
4.7 商品化新城疫标准抗原。
4.8 磷酸盐缓冲溶液(PBS),配制方法见附录A。
4.9 去离子水。
4.10 生理盐水。
4.11 96孔V形微量血凝板。
4.12 96孔ELISA酶标板。
4.13 鸡sIgA ELISA检测试剂盒。
4.14 抗凝管。
4.15 注射器。
4.16 密封袋。
4.17 浓硫酸。
4.18 苯酚。
5 仪器设备
5.1 恒温干燥箱。
5.2 超微粉碎机。
5.3 40目筛网。
5.4 电子天平。
5.5 pH计。
5.6 水浴锅。
5.7 旋转蒸发仪。
5.8 全自动血细胞分析仪。
5.9 分光光度计。
5.10 酶标仪。
5.11 磁力搅拌器。
5.12 移液器(10 μL~1000 μL)。
5.13 微量振荡器。
5.14 高压蒸汽灭菌器。
5.15 蒸馏装置。
5.16 分光光度计(380 nm~780 nm)。
5.17 电子天平。
5.18 坐标纸。
6 槐花多糖的提取
6.1 采集新鲜盛开的槐花,去梗后放入恒温干燥箱中于70 ℃烘干,用超微粉碎机粉碎成粉末状,过40目筛,装入密封袋,-20 ℃保存。
6.2 称取一定量的槐花粉与去离子水按体积1:25混合,用pH计调节pH至4.5,加入终浓度0.25 %的纤维素酶,45 ℃水浴中浸提1 h,提取4次,合并4次上清液,用旋转蒸发仪减压浓缩至1/5体积。
6.3 浓缩液用Sevag试剂(配制方法见附录A)除蛋白,重复两次,最后加入4倍体积的无水乙醇使多糖沉淀,对析出的多糖进行离心,冷冻干燥后即为槐花多糖。
7 苯酚-硫酸法测定多糖含量
7.1 葡萄糖标准液的配制
称取葡萄糖100 mg,蒸馏水定容至100 mL的1 mg/L的葡萄糖液,摇匀后吸取10 mL该溶液,用去离子水稀释定容至100 mL,即得100 ug/mL的葡萄糖标准液。
7.2 90 %苯酚液的配制
量取苯酚90 mL,用去离子水定容至100 mL,即得90 %苯酚液,棕色瓶中避光保存。
7.3 6 %苯酚液的配制
将90 %苯酚液稀释至6 %,即一体积储存液对应十四体积去离子水,临用现配。
7.4 实验步骤
7.4.1 标准曲线的制作
取8支干净的带塞试管,按表1方法分别加入相应体积的葡萄糖溶液,然后在冰水浴中加入0.5 mL的6 %苯酚溶液,震荡摇匀后缓慢逐滴加入纯硫酸,以不放热或微量放热为宜,摇匀后恒温加塞,沸水放置20 min,取出后用凉水冷却10 min,以0号作为空白调零,在最大吸收波长处(490 nm)测定吸光度。以葡萄糖浓度X为横坐标(μg/mL),吸光度Y为纵坐标,从而来绘制标准曲线。用excel软件求得回归方程。
表1 标准曲线的制作的试剂配制方法
管号 0 1 2 3 4 5 6 7
葡萄糖(mL) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7
苯酚液(mL) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
浓硫酸(mL) 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
7.4.2 待测样品多糖含量的测定与计算
将提取得到的待测多糖用去离子水溶解,定容至100 mL,取溶解后的溶液,按标准曲线中的测定方法,以样液为参比液,测定溶液的吸光值,按回归方程计算待测溶液的多糖浓度,乘以稀释倍数则为多糖含量。
7.5 质量标准
用苯酚-硫酸法测的多糖含量大于80 %以上,视为提取的槐花多糖合格。
8 生物活性评价
8.1 槐花多糖对鸡免疫功能的增强作用检测
将240只SPF雏鸡,随机分为4组,每组60只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为试验组,于9~12日龄,每天颈部皮下注射0.25 mL槐花多糖溶液。其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组槐花多糖含量分别为200 mg/mL、100 mg/mL、50 mg/mL,Ⅳ组为对照组,注射生理盐水。12日龄时各组免疫鸡新城疫灭活苗,于免疫后3 d、7 d、14 d、21 d,采样检测相关指标。实验鸡的饲养符合GB 14925的要求。
8.2 免疫器官指数
免疫7天后,各组随机取15只雏鸡,称量体重(称重前12 h停饲停水),剖杀前采集血液(检测后续指标用),分别摘取胸腺、法氏囊、脾脏并称重,计算出胸腺指数[胸腺重(g)/活体重(kg)],法氏囊指数[法氏囊重(g)/活体重(kg)],脾脏指数[脾脏重(g)/活体重(kg)]。
8.3 血清抗体效价的检测
免疫后3 d、7 d、10 d、14 d、21 d,采集各组雏鸡的血液,在37 ℃温箱静置2 h,分离血清,用血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验检测雏鸡血清抗体水平。血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验依据GB/T 14926.54。
8.4 白细胞数目及淋巴细胞比率的测定
用一次性医用抗凝管采集各组雏鸡的抗凝血1 mL,用全自动血细胞分析仪测定雏鸡血液内白细胞数目和淋巴细胞比率。
8.5 小肠内分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量的测定
雏鸡剖杀后,取10 cm长的十二指肠段,用3 mL 1 % BSA-PBS反复冲洗3次后,8000 rpm离心取上清,用商品化ELISA试剂盒检测上清中SIgA的含量。
我们的承诺:
16年品牌,更保证信誉;
顶级才智,更专业规范;
专家对话,更直接及时;
相比价格,更超值划算;
上千案例,更贴近实用!
[首 页] [返回] [留言板] [打印]
最新公告
· 年产8000吨精密锻造齿轮毛坯项.
· 低温灭菌设备及耗材项目可行性.
· 生化原料药、头孢原料药及医药中间.
· 年产950万个汽车温控模块项目可.
· 绿色食品开发(山泉水和生猪养殖).
· 重组人白细胞介素项目可行性研.
关于我们
老木一支笔,中国甲级工程咨询资质单位!具有国家发改委颁布的甲级工程咨询资质证书,专业:农业,轻工,食品,机械,建筑,建材,医药,化工,冶金,旅游,电子,纺织,能源,节能,市政,人防,综合经济等,资质高,专业多,通过率高!
独家优势
可信可靠:16年品牌不变,更保证信誉
一流专家:顶级才智锤炼,更专业规范
业务拓展:一站式全服务,更全面广泛
服务到位:专家在线对话,更直接及时
收费合理:相比价格合理,更超值划算
成功率高:上千案例积累,更贴近实用
可行性研究报告
· 可行性研究报告
· 可行性报告
· 可行性分析报告
· 可研报告
· 可行性论证报告
· 项目可行性报告
项目建议书
· 项目建议书
· 工程项目建议书
· 投资项目建议书
· 房地产项目建议书
· 农业项目建议书
· 医院项目建议书
项目申请报告
· 项目申请报告
· 发改委立项报告
· 用地申请报告
· 立项申请报告
· 项目申请书
· 立项报告
资金申请报告
· 资金申请报告
· 财政资金申请报告
· 专项资金申请报告
· 融资报告
· 企业融资计划
商业计划书
· 商业计划书
· 融资计划书
· 投资计划书
· 项目计划书
· 创业计划书
风险评估报告
· 投资价值分析报告
· 投资风险评估报告
· 项目数据分析报告
· 投融资综合分析报告
· 项目稳定回报论证报告
项目评估报告
· 项目评估报告
· 投资分析报告
· 项目论证报告
· 项目分析报告
· 项目投资报告
环境评价报告
· 环境评价报告
· 环评报告书
· 环评报告表
节能评估报告
· 节能评估报告
· 节能评估报告表
· 节能评估报告书
新闻中心 | 专家专栏 | 行业专栏 | 资讯专栏 | 投资政策 | 产业政策 | 各地政策 | 技术标准 | 销售中心 | 联系我们 | 收费问答 | 在线留言
版权所有:济南麦肯锦鸿管理咨询中心·老木一支笔 (中国著名品牌,16年诚信不变,专业品质锤炼,值得信赖托付!)
总部接待地址:山东省济南市文化东路29号三箭吉祥苑C座1-1104 总部创作中心:济南市文化东路16号中建文化城D座2-2101
山东总部:0531-88931929(传真) 15069190968 网址:http://www.laomu8.com 邮箱:laomu8@163.com QQ:353351933
旗下:可行性研究报告 商业计划书 可行性研究报告范文 可行性研究报告范文 山东可行性研究报告
Copyright@2006-2020 laomu8.com. All Rights Reserved 鲁ICP备09069317号-15 鲁公网安备37010202000599号/37010202000598号
本站关键词:可行性报告,可研报告,项目可行性报告,可行性研究报告,项目建议书,项目申请报告,资金申请报告,商业计划书,评估报告,能评报告.