饲料盐酸吗啉胍测定_老木一支笔专业编制可行性研究分析报告_资金项目立项申请报告

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饲料盐酸吗啉胍测定

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1　范围
本标准规定了配合饲料中盐酸吗啉胍的液相色谱-质谱/质谱测定方法。
本标准适用于配合饲料中盐酸吗啉胍的测定。
本标准方法检出限为0.05 mg/kg。
2　规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法
3　原理
试样中的盐酸吗啉胍用乙酸溶液提取，经乙腈稀释后，以亲水性液相色谱柱分离，带有电喷雾电离源的串联四极杆质谱测定，外标法定量。
4　试剂和材料
除非另有规定，仅使用分析纯试剂，水为GB/T 6682规定的一级水，其他试剂和材料主要包括：
a) 乙腈：色谱纯；
b) 正己烷；
c) 乙酸铵；
d) 乙酸溶液：取2.00 mL冰乙酸，用水稀释并定容至100 mL；
e) 乙酸铵溶液：准确称取0.772 g乙酸铵，用水溶解并定容至1 L；
f) 盐酸吗啉胍（CAS 3160-91-6）标准品：纯度不低于98.0 %；
g) 盐酸吗啉胍标准储备液：准确称取含盐酸吗啉胍50 mg（精确至0.1 mg）的标准品，置于50 mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，配制成浓度1.0 mg/mL的标准储备液。此溶液于4 ℃避光条件下储存，有效期为3个月；
h) 盐酸吗啉胍标准工作液：准确移取1.00 mL标准储备液于100 mL容量瓶中，加入95 mL乙腈，混匀，放至室温后用水定容至刻度，摇匀；
i) 微孔滤膜：孔径0.22 μm，有机系。
5　仪器
仪器和设备主要包括：
a) 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）和串联四极杆质量分析器；
b) 分析天平：感量为0.1 mg、0.01 g；
c) 超声波清洗器；
d) 离心机：5000 r/min；
e) 涡旋混合器。
6　测定步骤
6.1　样处理
称取2.0±0.05 g（精确至0.01 g）试样，置于30 mL具塞离心管中，准确加入20 mL/L乙酸溶液10 mL，在涡旋混合器上混匀1 min，超声提取10 min，5000 r/min离心10 min。取上清液5 mL置于30 mL离心管中，用5 mL、5 mL正己烷萃取两次，弃去正己烷层。准确移取下层清液0.5 mL于10 mL容量瓶中，加入8 mL乙腈混匀，待溶液放至室温后定容并摇匀，经微孔滤膜过滤后待测。
6.2　基质空白溶液的制备
称取2.0 g±0.05 g（精确至0.01 g）阴性试样，以下按6.1操作，制备基质空白溶液。
6.3　系列基质标准溶液的制备
准确移取适量体积的标准工作液，用基质空白溶液（6.2）稀释成盐酸吗啉胍浓度分别为0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 μg/mL、50 μg/mL的基质标准溶液。
6.4　仪器参考条件
6.4.1　液相色谱条件
液相色谱参考条件如下：
a) 色谱柱：内填亲水性色谱填料，100 mm×2.1 mm（i,d），粒径1.7μm，或相当者；
b) 流动相：乙腈、10 mmol/L乙酸铵溶液。梯度洗脱条件：0 min：95 %乙腈，4 min：线性变化至60 %乙腈，保持60 %乙腈至6 min，6.1 min：95 %乙腈，保持3 min；
c) 流速：0.3 mL/min；
d) 柱温：40 ℃；
e) 进样体积：10 μL。
6.4.2　质谱参考条件
参见附录A。
6.5　测定
将基质标准溶液和试样溶液在相同的条件下进样测定，若试样溶液和基质标准溶液质量色谱图中盐酸吗啉胍的保留时间一致，定性定量离子信噪比均大于3，且定性离子对的相对丰度偏差符合表1的规定，则可判定样品中检出盐酸吗啉胍。以基质标准溶液中盐酸吗啉胍定量离子对的峰面积对相应的浓度绘制标准工作曲线，外标法定量。
表1　定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度 50 % 20 %至5 0% 10 %至20 % ≤10 %
允许的相对偏差 ±20 % ±25 % ±30 % ±50 %
6.6　结果计算
6.6.1　试样中盐酸吗啉胍的含量按式（1）计算：
(1)
式中：
X ——试样中盐酸吗啉胍的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
c ——由标准曲线得出的测定液中盐酸吗啉胍的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL)；
V ——测定液体积，单位为毫升（mL）；
m ——试样的质量，单位为克（g）；
n ——稀释倍数。
6.6.2　计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留两位有效数字。
7　精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %。

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