肥料中壳聚糖含量测定_老木一支笔专业编制可行性研究分析报告_资金项目立项申请报告

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肥料中壳聚糖含量测定

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1　范围
本标准规定了含壳聚糖肥料中壳聚糖含量的测定方法。
本标准适用于由虾蟹壳为原料加工处理而成的水溶性壳聚糖的测定。
2　规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
HG/T 2843 化肥产品化学分析常用标准滴定溶液、标准溶液、试剂溶液和指示剂溶液
3　方法原理
肥料中壳聚糖经水解后生成氨基葡萄糖，与乙酰丙酮和对二甲氨基苯甲醛生成红色化合物，在525nm波长处用分光光度计测定。
4　试剂或材料
本标准中所用试剂、水和溶液的配制，在未注明规格和配制方法时，应符合HG/T 2843的规定。
4.1　盐酸：分析纯。
4.2　无醛乙醇（或四无乙醇）：分析纯。
4.3　氢氧化钠：分析纯。
4.4　无水碳酸钠：分析纯。
4.5　氢氧化钠溶液：400 g/L。称取分析纯氢氧化钠40 g，加水至100 mL。
4.6　碳酸钠溶液：c（1/2Na2CO3）=1.0 mol/L。称取无水碳酸钠2.65 g，加水至50 mL。
4.7　乙酰丙酮溶液：取乙酸丙酮3.5 mL，加入碳酸钠溶液（4.6）至50 mL，置冰箱中备用，应于使用前一日配制。
4.8　对二甲氨基苯甲醛溶液：称取对二甲氨基苯甲醛0.8 g，加无醛乙醇（4.2）15 mL及盐酸（4.1）15 mL，摇匀。
4.9　盐酸氨基葡萄糖标准品：99.9%。
4.10　盐酸氨基葡萄糖标准储备溶液：ρ（盐酸氨基葡萄糖）=1.000 mg/mL。称取105℃干燥至恒重的盐酸氨基葡萄糖0.1 g（准确至0.0002 g），置100 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。
4.11　盐酸氨基葡萄糖标准溶液：ρ（盐酸氨基葡萄糖）=0.1000 mg/mL。准确移取盐酸氨基葡萄糖标准储备溶液（4.7）10.00 mL，至100 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。
5　仪器
5.1　分光光度计，带有光程为1 cm的吸收池，可在525 nm处测量。
5.2　恒温水浴锅。
5.3　恒温干燥箱。
5.4　分析天平：感量0.0001 g。
6　分析步骤
6.1　试样的制备
固体样品缩分至约100 g，将其迅速研磨至全部通过0.50 mm孔径试验筛（如样品潮湿，可通过1.00 mm试验筛），混合均匀，置于洁净、干燥容器中；液体样品经多次摇动后，迅速取出约100 mL，置于洁净、干燥容器中。
6.2　试样溶液的制备
称取含壳聚糖约200 mg的试样（固体或液体）适量（称准至0.0002 g），置于50 mL 烧杯中加水溶解，定量转移到100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，如有必要干过滤，弃去初滤液。准确移取1.00 mL于25 mL具塞刻度试管中，加5 mL浓盐酸溶液，摇匀，盖上试管塞，于100℃水浴（或能达到同等水解温度的恒温干燥箱）水解2 h，冷却，用氢氧化钠溶液中和至7（用pH试纸检测），加水稀释至刻度，摇匀，作为试样溶液。
6.3　标准曲线的绘制
移取盐酸氨基葡萄糖标准溶液（4.11）0.00 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL分别置于25 mL具塞刻度试管中，然后再分别加入5.00 mL、4.00 mL、3.00 mL、2.00 mL、1.00 mL、0.00 mL蒸馏水至5.00 mL，各加入乙酰丙酮溶液（4.7）2.00 mL，摇匀，于100℃水浴中（1 min后加盖）静置25 min，取出，用冰水迅速冷却后，加入无醛乙醇3.00 mL，于60℃水浴中静置10 min后，再加入对二甲氨基苯甲醛（4.8）2.00 mL，用力振摇后，由60℃水浴中静置1 h，取出立即用冷水冷却至室温，加蒸馏水定容至25mL，摇匀，配成一系列含盐酸氨基葡萄糖分别为0 mg、0.1 mg、0.2 mg、0.3 mg、0.4 mg、0.5 mg的标准工作溶液。在波长525 nm处，用1 cm比色皿，以试剂空白为参比液，测其吸光值，拟定标准曲线方程。比色过程在30 min内完成。
6.4　试样的测定
准确移取试样溶液2.00 mL（约含盐酸氨基葡萄糖300 μg）置于具塞试管中，按6.3中“用蒸馏水稀释至5.00 mL”及其后面的步骤进行。对于颜色较深的样品，以1 mL盐酸（4.1）代替对二甲氨基苯甲醛溶液作为空白，其他操作同样品。
将测得的吸光值带入标准曲线方程，求得氨基葡萄糖的质量。
6.5　空白试验
除不加试样外，其他步骤同试样溶液。
7　分析结果的表达
以质量分数表示的壳聚糖（以氨基葡萄糖计）的质量分数
   (1)
式中：
m1 ——求得的试样盐酸氨基葡萄糖的质量，单位为毫克（mg）；
      m0 ——空白盐酸氨基葡萄糖的质量，单位为毫克（mg）；
      m——试样的质量，单位为克（g）；
0.8309——盐酸氨基葡萄糖换算为氨基葡萄糖的系数。
8　允许差
平行测定结果和不同实验室测定结果的允许差应符合表1要求
表1　平行测定结果和不同实验室测定结果的允许差
海藻酸含量，% 平行结果测定的绝对差值，% 不同实验室测定结果的绝对差值，%
ω≤2.0 ≤0.2 ≤0.4
2.0＜ω≤5.0 ≤0.5 ≤1.0
5.0＜ω≤10.0 ≤1.0 ≤2.0
ω＞10.0 ≤2.0 ≤4.0

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